西安淳风生物科技有限公司
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DNA pull down

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DNA pull down



▼背景说明

     

            DNA pull down以感兴趣的DNA序列为中心,寻找与该序列结合的蛋白质,最常见的应用是寻找某特定基因启动子的转录因子。

    启动子通常位于结构基因5'端上游,含有RNA聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列。转录因子也称反式作用因子,是一种DNA结合蛋白,它能与真核基因的顺式作用元件(如启动子、增强子等)特异性结合来激活或抑制基因表达。转录因子有4个主要结构域:DNA结合域决定转录因子的特异性,转录调控域(包括激活域或抑制域)决定转录因子的功能,寡聚化位点使不同转录因子间发生相互作用,核定位信号控制转录因子进入细胞核。

    一个基因的启动子通常会结合多种转录因子,寻找启动子的特异转录因子,有助于我们理解这些启动子下游的功能基因是如何被调控的。


▼应用场景

    

   DNA pull down用于研究DNA结合蛋白和特定的DNA序列的相互作用。


 ▼实验原理

          

         DNA pull down是一种研究DNA与蛋白互作的方法。其原理是:生物素标记的DNA 片段结合在链霉亲和素磁珠上,再与核蛋白孵育,从而捕获并纯化出与DNA 片段互作的蛋白。捕获的蛋白一方面可以通过Western blot验证某一特定蛋白是否与靶DNA 片段结合;另一方面也可以进行质谱鉴定,筛选出与DNA片段可能互作的蛋白质。


 ▼服务内容


 

    

▼我们的优势

  

   1.表达蛋白时有独家改造的适合不同蛋白表达的标签载体,确保表达出可溶性蛋白;

    2.原核表达对培养基、温度、ph、时间、分子伴侣等进行优化组合,确保可溶性蛋白产量;

    3.添加各种裂解液和蛋白酶抑制剂的超声破碎缓冲液,确保蛋白产量;

    4.独特的超滤缓冲液配方,保护蛋白且不影响蛋白和DNA结合;

    5.Thermo原装试剂标记探针,保证标记效率;

    6.独特的Streptavidin Beads 6FF洗杂液配方,确保非特异结合蛋白的流出;

    7.独特的Streptavidin Beads 6FF洗脱液配方,确保生物素探针的完全洗脱;

    8.独家封闭液和洗涤液,降低实验背景。