DNA pull down / EMSA / GST pull down / 三代全长质粒测序
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Southern杂交实验是分子生物学最经典的实验方法之一。
Southern杂交实验可以确定出来是否有与探针同源的片段以及检测到的DNA样品中片段的长度。某些Southern杂交技术被广泛应用于遗传疾病的检测过程中、DNA指纹检测分析、以及PCR产物判断中。但该技术也具有其独特的实用性和普及性,无法通过其他方法进行代替,例如片段多态性检测(RFLP)。
Southern杂交实验是对基因组DNA特定序列进行检测的常用方法,首先提取基因组并利用限制性内切酶消化DNA,在琼脂糖凝胶进行电泳分离,将DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量。具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下,可按碱基互补的原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。由于核酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性,综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果,便可绘制出DNA分子的限制图谱。
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