凝胶迁移实验（EMSA）

▼背景说明

    凝胶迁移实验又称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验（Electrophoretic Mobility Shift Assay，EMSA），其原理基于蛋白-探针复合物在凝胶电泳过程中比对照组迁移更慢，是一种用于检测蛋白与核酸相互作用的技术。根据实验设计特异性和非特异性探针，当核酸探针与蛋白样本混合孵育时，样本中可以与核酸探针结合的蛋白质与探针形成蛋白-探针复合物，这种复合物由于分子量大，在进行PAGE电泳时迁移较慢，而没有结合蛋白的探针则迁移较快。孵育的样本在进行PAGE电泳并转膜后，蛋白-探针复合物会在膜靠前的位置形成一条带，说明有蛋白与目标探针发生互作。

▼应用场景

          EMSA用于研究DNA结合蛋白和特定的DNA序列、RNA序列的相互作用以及DNA定性和定量分析。

▼实验原理

    EMSA是一种研究转录因子与DNA结合的实验技术, 可用于定性和定量分析。通常将纯化的蛋白和同位素或生物素标记的DNA探针共同孵育, 然后在非变性聚丙烯凝胶上电泳, 从而将DNA-转录因子复合物与不结合的探针分离。由于分子量变大, DNA-转录因子复合物比不结合的探针迁移速度慢, 因此转录因子结合标记探针后使自由探针含量减少。研究者通常按照上述2个标准判断转录因子是否结合DNA。

▼服务内容

▼我们的优势

1. 表达蛋白时有独家改造的适合不同蛋白表达的标签载体，确保表达出可溶性蛋白；

2. 原核表达对培养基、温度、ph、时间、分子伴侣等进行优化组合，确保可溶性蛋白产量；

3. 添加各种裂解液和蛋白酶抑制剂的超声破碎缓冲液，确保蛋白产量；

4. 独特的超滤缓冲液配方，保护蛋白且不影响蛋白和DNA结合；

5. Thermo原装试剂标记探针，保证标记效率；

6. 独家EMSA结合缓冲液，确保弱互作能够正常结合；

7. 独家封闭液和洗涤液，降低实验背景。